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脊柱脊髓的基因療法

  分子生物學(xué)的高速發(fā)展,為脊髓損傷的治療提供了新的途徑與手段。

  早在1996年,美國(guó)學(xué)者Tuszynski即已應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)治療脊髓損傷,他以反轉(zhuǎn)錄病毒為載體,將NGF基因轉(zhuǎn)入成纖維細(xì)胞中,然后再移植到半橫斷損傷的大鼠脊髓中。

  14個(gè)月后,通過(guò)RT-PCR技術(shù)證明,在成纖維細(xì)胞中有NGF表達(dá);免疫組化觀察發(fā)現(xiàn),有感覺(jué)神經(jīng)軸突和去甲腎上腺素能神經(jīng)軸突的再生,并發(fā)現(xiàn)部分大鼠局部運(yùn)動(dòng)神經(jīng)軸突的芽生。

  同年,Kim等(1996)報(bào)告將NGF和BDNF基因同樣轉(zhuǎn)入成纖維細(xì)胞,并移植到脊髓挫傷的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,也具有促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)的作用。

  次年,Blesch等(1997)采用此方法治療慢性脊髓損傷,他在傷后1~3個(gè)月時(shí)將轉(zhuǎn)NGF基因的成纖維細(xì)胞植入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物損傷處,發(fā)現(xiàn)移植3~5個(gè)月后,移植區(qū)出現(xiàn)明顯的基因表達(dá)和軸突生長(zhǎng)。

  同年,Grill等(1997)也將轉(zhuǎn)NT-3基因的成纖維細(xì)胞移植于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓半橫斷處,3個(gè)月后發(fā)現(xiàn)有軸突生長(zhǎng)和功能的明顯恢復(fù)。

  次年,Menei等(1998)又將轉(zhuǎn)BDNF基因的SC移植于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓橫斷處,1個(gè)月后發(fā)現(xiàn)有再生反應(yīng)。

  1999年,Weidner等學(xué)者的研究證明,轉(zhuǎn)NGF基因的SC能促使受損脊髓軸突的生長(zhǎng)。

  同年,Blesch等(1999)又將轉(zhuǎn)白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)基因的成纖維細(xì)胞移植至脊髓受損處,2周后顯示皮質(zhì)脊髓束的再生反應(yīng)明顯,并伴有損傷部位NT-3的強(qiáng)表達(dá)。

  2000年,Miura等的研究表現(xiàn)將整合MEK1基因的腺病毒載體直接注射到動(dòng)物脊髓橫斷處,可見(jiàn)軸突出現(xiàn)再生及下肢運(yùn)動(dòng)功能的明顯恢復(fù)。

  同年,Blits等(2000)將NT-3基因通過(guò)腺病毒先植入肋間神經(jīng),之后移植到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓半橫斷處,16周后與對(duì)照組相比,前者下行的皮質(zhì)脊髓神經(jīng)纖維增加到3~4倍,與此同時(shí),后肢的運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)也很好。

  同時(shí),Takahashi等(1999)利用轉(zhuǎn)Bcl-2基因的DNA質(zhì)粒注射到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓半橫斷處,2個(gè)月后顯示神經(jīng)元無(wú)明顯丟失,有61%的大神經(jīng)元存活。盡管以上研究結(jié)果為脊髓損傷的治療提供了新的希望,但大多仍處于探索性階段,在臨床應(yīng)用上尚有許多問(wèn)題有待解決。

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